在外面之前的科普文章中，已经多次给大家介绍过乙肝病毒的cccDNA。cccDNA是由病毒基因组rcDNA进入细胞核后形成的，作为病毒蛋白及后代病毒产生的模板存在。由于它模仿细胞基因组形成了微小染色体，在核内长期存在。

目前的乙肝抗病毒药物中的核苷类似物（也就是我们常用的口服抗病毒药）主要目的是抑制病毒的逆转录过程，无法直接针对cccDNA。这就导致了乙肝病毒HBV很难被现今治疗方案根除，以至于大部分慢乙肝患者需要持续吃药。

目前我们对于cccDNA的形成和降解机制仍不清楚，但cccDNA在细胞中的水平很低，先天性免疫可以部分解释这个原因。实验表明cccDNA可能会被APOBECs等宿主病毒限制因子通过直接的脱氨基而破坏，或者通过产生过度变异的病毒基因组，从而导致形成的cccDNA无法产生可以存活的乙肝病毒HBV。

今天我们要给大家介绍的这项研究就是关于cccDNA的维持机制的。以往的研究表明，DNA甲基化酶DNMT3A是一把“双刃剑”：它一方面参与了机体的抗病毒机制，它的上调表达会甲基化cccDNA从而抑制其转录和复制；但是另一方面它也会甲基化宿主的DNA，从而导致损伤的积累，并有可能能推动肝癌的发展。

在这项研究中，研究者将DNMT3A转染至乙肝病毒HBV表达的细胞系，使用crispr/cas9敲除APOBEC3A和APOBEC3B基因的表达，用qPCR、southern印迹和表面抗原定量来检测HBV复制及靶基因表达的改变，使用荧光细胞分选分析细胞周期。研究结果显示，乙肝病毒HBV的复制诱导了DNA甲基化酶DNMT3A的表达，从而导致HBV转录本的减少，但是却提高了cccDNA的增加。因为DNA甲基化酶DNMT3A加速了感染细胞的增殖，而且不能通过阻断细胞静止来促进cccDNA池的补充，所以细胞周期与cccDNA水平的升高无关。与此同时，DNA甲基化酶还抑制了APOBEC3A和APOBEC3B这两个先天免疫因子的转录。经crispr/cas9敲除的APOBEC3A和APOBEC3B基因对HBV转录本的影响较小，但显著使cccDNA的水平升高，这与DNA甲基化酶DNMT3A得到的结果类似。研究者进一步的将DNA甲基化酶过表达结果显示，DNMT3A通过诱导DDR因子的异常表达来促进基因组的不稳定性，并推测可能通过抑制ATM和ATR细胞水平间接地限制HBV的转录。

这项研究通过细胞实验证明了先天免疫因素DNMT3A的表达是HBVcccDNA形成的限制因素。阐明HBVcccDNA内在形成和降解机制才会为cccDNA提供治疗靶标,从而达到临床治愈。相对于目前不那么清楚的cccDNA相关机制，我们希望在此项研究之后，医学界能出现更多进展，从而推动乙肝治愈研究的进一步发展。

参考文献：ReplenishmentofHepatitisBViruscccDNAPoolIsRestrictedbyBaselineExpressionofHostRestrictionFactorsInVitro